MeDIP

甲基化DNA免疫共沉淀（Methylated DNA Immunoprecipitation，MeDIP），是检测分析基因组甲基化的实验技术。其原理是利用5'-甲基胞嘧啶抗体（anti-m5C），特异识别并结合发生甲基化的DNA片段，形成抗体-DNA片段复合物。通过与免疫共沉淀相似的方法，使用琼脂糖微珠或磁珠捕获并富集抗体-DNA片段复合物。其后通过qPCR或高通量测序，对特定目标区域或者全基因组的甲基化进行分析。

技术流程概述：

1、细胞核或者线粒体提取与基因组片段化

提取培养细胞或者组织的细胞核或线粒体后裂解并收集基因组DNA和蛋白质，随后利用超声破碎仪将基因组DNA打断成200-500bp左右的片段；

2、免疫沉淀

使用5'-甲基胞嘧啶抗体（anti-m5C），再以偶联Protein A、Protein G 或Protein A/G的琼脂糖微珠或磁珠捕获抗体-DNA复合物，通过离心或磁力架收集使抗体-DNA复合物与其他非目标组分分离；

3、纯化与回收

通过不同buffer的洗涤、洗脱，纯化收集甲基化DNA片段；

4、富集DNA的检测分析

通过qPCR、杂交芯片、高通量测序等方法分析所富集的DNA片段信息，最终确定富集DNA的序列信息。

结果展示：

客户提供的材料与信息：

1、目标DNA位点信息；

2、细胞样本，细胞量不低于3×10^7个细胞；

3、组织样本不低于1g；

4、或实验方案设计。