RNA稳定性检测（放线菌素D处理法）

放线菌素D（Actinomycin D）可在数分钟内被细胞吸收，并优先嵌入到富含GC的DNA序列中，形成稳定的复合物，抑制所有真核RNA聚合酶的转录进程。利用放线菌素D处理不同时间长度后，检测目标RNA（如mRNA、lncRNA）的分子水平，推算目标RNA的半衰期，评估其稳定性。此实验是研究RNA分子转录后调控的常用方法之一。

技术流程概述

1、细胞培养，按实验设计分组处理；

2、放线菌素D处理，每个实验分组设置不同的时间点；

3、到达相应时间点后，收集细胞，提取总RNA；

4、去除基因组DNA；

5、反转录合成cDNA并进行qPCR检测目标RNA与参照RNA的分子水平；

6、数据分析，计算目标RNA的半衰期。

客户提供的材料与信息

1、目标RNA

2、实验分组设计